一、石蠟切片的過(guò)程：

1、取材:刀片要求鋒利而薄,組織厚度約2—3mm,大小1.5×1.5×0.2～0.3cm為宜.取材時(shí)間越快越好.

2、固定:組織取下后應(yīng)立即放入10%福爾馬林（相當(dāng)于4%甲醛）固定.

注意:①固定液量應(yīng)為組織塊體積的40倍.

②固定時(shí)間固定時(shí)間與使用的固定液種類(lèi)和組織塊大小,溫度等有關(guān).一般為3—24h.

③固定溫度大多可在室溫固定,在低溫（4℃）時(shí)間應(yīng)延長(zhǎng).

④固定容器應(yīng)大些.

3、漂洗:流水沖洗2—10h.

4、脫水:從低濃度酒精到高濃度酒精.

70%（數(shù)分鐘）→80%（60-120’）→90%（60-120’）→95%（60-120’）→95%（60-120’）→100%（60-120’）→100%（60-120’）.

5、透明:組織塊脫水后必須經(jīng)過(guò)一種既能與酒精混合又能溶解石蠟的溶劑,而使石蠟進(jìn)入組織塊.常用二甲苯,一般浸泡30m即可.

6、浸蠟:組織經(jīng)透明后在熔化的石蠟內(nèi)浸漬的過(guò)程稱(chēng)浸蠟.一般需經(jīng)2—3次浸漬才能完成,總時(shí)間為3—4h.用于浸蠟的石蠟熔點(diǎn)為52—56℃.

7、包埋:先將熔化的石蠟倒入包埋框再用加熱的鑷子將組織塊放入.包埋面必須平整.包埋后石蠟稍凝后可移入冷水或冰箱中加速凝固.

8、切片:修塊→切片→展片→撈片→烤片.也可作冰凍切片.

二、熒光染料的配制：

儲(chǔ)藏液：1mg/mldapi（DMSO、去離子水、pbs都可以溶解）

工作液：通常1μg/ml

染色時(shí)須避光，10min左右

用pbs沖去多余染液即可觀察。



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